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保健食品中茶多酚的测定方法
来源:-    浏览:140   更新时间:2011年12月02日
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一、鉴别试验
1. 试剂:1克香荚兰素溶于100ml盐酸中,用时现配。
2. 鉴别方法:
取10ml样品溶液(4%)放蒸发皿中蒸干,然后滴加香荚兰盐酸溶液生成樱桃红色。这是儿茶素类化合物的特异显色剂,不受花色素和黄酮甙的干扰,具专属性,缺儿茶素的样品呈阴性。
二、含量测定:
1. 原理
多酚类物质能与亚铁离子生成蓝紫色络合物。用分光光度法测定其含量。
2. 试剂
2.1 酒石酸铁溶液:称硫酸亚铁(FeSO4.7H2O)1g酒石酸钾钠(KNaC4 H4O6.4H2 O)5g加水溶解并定容至1L,此液可稳定10天。
2.2 pH7.5的索伦逊缓冲液(先配制以下两种溶液)
a 1/15 M的磷酸氢二钠溶液:称取Na2HPO4.12H O23.877g,加水溶解并稀释至1L。
b 1/15M的磷酸二氢钾溶液:称取经110℃烘干2h的KH2PO49.078g,加水溶解至1L。
取溶液a 85ml和溶液b 15ml混匀,即得pH7.5的缓冲液。
2.3 茶多酚标准溶液
秤取茶多酚标准0.2000g,加溶解并稀释至100.0mL。
3. 测定方法
3.1 茶多酚标准曲线制备:
分别吸取茶多酚标准溶液(2mg/ml):0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0ml分别盛放25.0ml的比色管中,加水1.0ml,再加4.0ml水,然后加5.0ml酒石酸铁溶液,加PH7.5缓冲液至刻度,摇匀,放540nm比色。
4. 样品测定:
称取一定量样品(约1g),用水溶解至25.0mL,经过滤,弃去初滤液,吸取0.5ml滤液放25ml的比色管中,加0.5ml水,再加4.0ml水,然后加5.0ml酒石酸铁溶液,然后用PH7.5缓冲液稀释至刻度。
与标准管同时比色测定。
4. 计算:
X=­C×V1 /V2/m×100/1000
式中 X:样品中茶多酚含量g/100g;
V1:样品溶液总体积mL;
V2:测定用样品溶液体积mL;
m:样品质量g。
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