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保健食品中β-胡萝卜的测定方

来源：- 浏览：160 更新时间：2011年12月02日

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1 原理
样品中的β-胡罗卜素，经石油醚和丙酮的混合液（80+20）提取，经三氧化铝柱纯化，然后以高效液相色谱法测定，以保留时间定性，峰高或峰面积定量。
2 试剂
2.1 石油醚：沸程30-60℃；
2.2 甲醇：优级纯；
2.3 丙酮：分析纯；
2.4 乙腈：色谱纯；
2.5 三氧化二铝：层析用，100-200目，140℃活化2小时，取出放入干燥器中备用。
2.5 β-胡罗卜素标准溶液：精确称取β-胡萝卜素5.0mg，先用少量三氯甲烷溶解，再用石油醚溶解开洗涤烧杯数，溶液转入25.0mL容量瓶中。用石油醚定容，浓度为200μg。冰箱保存。临用时，吸取1.0mL于10.0mL容量瓶中，加移动相至刻度。即得20μg/Ml。
3 仪器
3.1 高效液相色谱仪；
3.2 离心机；
3.3 旋转蒸发仪。
4 分析步骤
4.1 样品提取
4.1.1 固体样品：称取0.25~1.0g样品于25mL带塞量筒中，用石油醚和丙酮混合液振摇提取，合并提取液，定容至一定体积。通过微孔滤膜（0.45μm）过滤，此液作HPLC分析用。
4.1.2 液体样品：吸取1.0~5.0mL样品于25mL带塞量筒中，用石油醚和丙酮混合液振摇提取，合并提取液，定容至一定体积，通过微孔滤膜（0.45μm）过滤，此液作HPLC分析用。
4.3 测定
将上述溶液进行HPLC分析，同时测定标准溶液，进行峰面积比较定量。
HPLC分析条件：
分析柱：Spherissorb C18 4.6×150mm；
移动相：甲醇+乙腈（90+10）；
流速：1.2mL/min；
波长；λ=448nm。
5. 计算
X=A1/A2×C×V1/m（V）×100/1000
式中：X=样品中β-胡罗卜素的含量，mg/100g；
A1=样品的峰面积；
A2=标准的峰面积；
C=β-胡罗卜素标准液的浓度，μg/mL；
V1=样品定容的体积，mL；
m=样品的质量，g；
V=液体样品的体积，mL。

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