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保健食品中L－谷氨酰胺含量测定方法

来源：- 浏览：131 更新时间：2011年12月02日

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1 试剂
1.1 乙腈色谱纯。
1.2 磷酸二氢钾分析纯。
1.3 L－谷氨酰胺标准溶液准确称量L－谷氨酰标准品0.050g，加入检测用流动相并定容至250mL。此溶液每mL含1mgL－谷氨酰胺。
2 仪器设备
2.1 高效液相色谱仪：附紫外检测器（UV）。
2.2 超声波清洗器。
2.3 离心机。
3 分析步骤
3.1 样品处理：准确称取一定量片剂粉末或胶囊内容物于试管中，加入流动相100mL，使浓度为每毫升中大约含L－谷氨酰胺10mg。超声提取5min后以3000rpm/min离心3min。经0.45μm滤膜过滤后待进样。
3.2 液相色谱参考条件
3.2.1 色谱柱：μ－BONDAPAKTM C18 4.6×250mm。
3.2.2 柱温：室温。
3.2.3 紫外检测器：检测波长220nm。
3.2.4 流动相：乙腈：水：磷酸二氢钾=200mL：800mL：2g。
3.2.5 流速：0.8mL/min。
3.2.6 进样量：10μL。
3.2.7 色谱分析：量取10μL标准溶液及样品溶液注入色谱仪中，以保留时间定性，以试样峰高或峰面积与标准比较定量。
4 结果
4.1 计算

式中：X－样品中L－谷酰胺的含量，mg/g；
h1－样品峰高或峰面积；
C－标准溶液浓度，mg/mL；
V－样品定容体积，mL；
h2－标准溶液峰高或峰面积。
m－试样量，g。
4.2 精密度和准确度
对本方法进行精密度和准确度试验，方法的回收率在96.6%~99.8%之间，相对相差≤3%。

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