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保健食品中糖甙B含量测定方法
来源:-    浏览:249   更新时间:2011年12月02日
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1、试剂
1.1乙腈 色谱纯
1.2甲醇 优级纯
1.3糖甙B标准储备溶液 准确称量糖甙B标准品40mg于25ml容量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度。
1.4糖甙B标准使用溶液 将糖甙B标准储备溶液用50%甲醇(V/V)稀释10倍。
2、仪器设备
2.1高效液相色谱仪:附紫外检测器(UV)。
2.2超声波清洗机。
3、分析步骤
3.1样品处理
3.1.1准确称取样品溶液200mg于50ml容量瓶中,加入50%甲醇溶液至刻度,混匀且经0.45μm滤膜过滤后待进样。
3.1.2准备称取5g固体样品,以40ml50%甲醇回流提取30min,通过玻璃棉过滤至100ml容量瓶。玻璃棉及样品再以40ml50%甲醇回流提取30min,并通过玻璃棉过滤,玻璃棉及样品用50%甲醇冲洗,并定容刻度。混匀且经0.45μm滤膜过滤后待进样。
3.2液相色谱参考条件
3.2.1色谱柱:μ-Bondapak C18 4.6×250mm。
3.2.2柱温:25℃。
3.2.3紫外检测器:检测波长215nm。
3.2.4流动相:A:乙腈;水=50:950
B:乙腈:水=600:400
3.2.5梯度洗脱条件:
  时 间   流动相
a b
0 97 3
5 97 3
30 60 40
31 5 95
45 5 95
45.1 97 3
60 97 3

3.2.6流速:1ml/min。
3.2.7进样量:10μL。
3.2.8色谱分析:量取10μL标准溶液及样品溶液注入色谱仪中,以保留时间定性,以试样峰高或峰面积与标准比较定量。
4、结果
4.1计算



式中: X-样品中糖甙B的含量,mg/g;
C-样品峰高或峰面积;
-标准溶液浓度,μg/ml;
V-定容体积,ml;
-标准溶液峰高或峰面积;
m-试样量,g。
4.2精密度和准确度
对本方法进行精密度和准确度试验,方法的回收率在92%~98%之间,相对相差≤5%。
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