| 1、方法原理 | 利用高效亲和色谱的原理，在磷酸盐缓冲液条件下接配基，pH2.5的盐酸甘氨酸条件下洗脱免疫球蛋白IgG。 2、试剂 2.1 pH6.5 0.05mol/L 磷酸盐缓冲液 A液 2.2 pH2.5 0.05mol/L 甘氨酸盐酸缓冲液 B液 2.3 IgG标准贮备液：称取IgG标准品（Sigma化学公司）0.0100g，用重蒸水溶解并定容至10.0mL，摇匀，此液含1.0mg/mL LgG。 2.4 IgG标准系列溶液：以IgG标准贮备液，用重蒸水稀释成含IgG 0.2mg/mL，0.4mg/mL，0.6mg/mL，0.8mg/mL，1.0mg/mL的标准系列。 3、仪器 HPLC仪具紫外检测器和梯度洗脱装置。 4、测定 4.1 样品处理：称取0.1g样品，用A液稀释至25.0mL，摇匀，通过0.45 μm微孔滤膜后进样。 4.2 HPLC参数条件 色谱柱：Pharmacia HI-Trap Protein G柱 波长：280nm 移动相：A液 B液 进行梯度洗脱，见下表。 表1 梯度洗脱表
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