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三尖杉酯碱的测定方法（高效液相色谱法）

来源：- 北京虎网浏览：125 更新时间：2011年12月01日

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本方法适用于保健茶中三尖杉酯碱的测定。
本方法三尖杉酯碱的最低检出量为0.01μg。
1. 方法提要
样品经碱化，氯仿提取后挥干，加入一定量的流动相溶解，经C18反相柱分离，紫外检测器测定。
2. 仪器
高效液相色谱仪-486UV检测器-810型工作站。
3. 试剂
（1）氢氧化氨、氯仿、磷酸二氢钾、甲醇（均为分析纯），三尖杉酯碱对照品（含量95%）。
（2）标准使用液：
① 标准对照品浓度：1mg/mL。
② 标准使用液线性范围：0.1~1mg/mL(2~20μg)。
4. 测定步骤
（1）样品处理：准确称取研细混匀的样品1.00g于100mL具塞三角瓶中，加入14%氢氧化铵1mL，用氯仿20mL提取2次，收集提取液，挥干，加入一定量的流动相溶解，定容至5.0mL，用0.45μm滤膜过滤，滤液备用。
（2）色谱分离条件：
色谱柱：3.9mm×150 C18反相柱（室温）。
流动相：0.01mol/L磷酸二氢钾+甲醇（60+40）。
流速：1mL/min。
波长：288nm。
（3）样品测定：准确吸取样品处理液和标准使用液各20μL注入高效液相色谱分离测定。以对照品峰的保留时间定性，以其峰面积计算样品中待测物质的含量。

5. 结果计算

式中 c——标准对照品工作液浓度（mg/mL）；
S1——标准对照峰面积；
V1——标准对照品进机测定的体积（μL）；
S2——样品峰面积；
V2——样品进机测定的体积（μL）；
V——样品定容的体积（mL）；
m——样品质量（g）。
本方法回收率为90%以上，标准偏差1.50%。
6. 注释
三尖杉属植物三尖杉的树皮、根皮、小枝和叶。含有三尖杉酯碱等有效成分，具有防癌之功效。

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